Акция «Ночь в музее» проводится ежегодно в мае, посвящается Международному Дню музеев и отражает в своей программе крупные важные события годового календаря знаменательных дат федерального, регионального и местного значения. Для посетителей разного возраста проводятся обзорные и тематические экскурсии, интерактивные занятия, мастер-классы, встречи с интересными людьми, работают игровые и концертные площадки. В 2021 году тематика мероприятий в рамках акции будет подчинена юбилейному событию в истории отечественной и мировой космонавтики: 60-летию первого полёта человека в космос. Акция пройдёт в Музее Первого полёта, в собрании которого представлены материалы по строительству космодрома Байконур, отбору и подготовке первого отряда космонавтов, Совету Главных конструкторов, предприятиям, которые внесли вклад в разработку и изготовление ракетно-космической системы «Восток»; посетители увидят памятник науки и техники – подлинную сурдобарокамеру (СКБ-48), в которой проходили тренировки члены первого отряда советских космонавтов (в т.ч. Ю.А. Гагарин). Юные посетители смогут посетить Планетарий «Медиум+».